All 7: Latexallergien

Laufzeit:1/1999 - 12/2001

Projektziel:

Ziel des Projekts war die Entwicklung von Messmethoden für die wichtigsten Latexeinzelallergene als Hilfsmittel zur Standardisierung der Allergenbestimmung in Diagnostika, Latexprodukten und in Staubproben vom Arbeitsplatz. Anhand der Analysedaten sollten Belastungsquellen am Arbeitsplatz definiert und geeignete Schutzmaßnahmen eingeleitet werden. Es gilt, die Gefährdung durch Latexallergene an Arbeitsplätzen zu minimieren bzw. Latex-bedingten Erkrankungen vorzubeugen.

Methoden:

Latex-spezifische IgE-Bestimmung im CAP-Verfahren, Herstellung von rekombinanten Einzelallergenen durch Klonierung und Expression als Fusionsproteine mit Maltosebindeprotein (MBP) oder mit "Histidin-Tag"; Reinigung rekombinanter Proteine durch Affinitätschromatographie; Kopplung an Immuno-CAPs in Zusammenarbeit mit der Firma MIAB, Upsala Schweden; Herstellung von monoklonalen Antikörpern und Anreicherung im Minifermenter, Antikörperreinigung durch Affinitätschromatographie mit selbstgekoppelten Antigensäulen per FPLC, Optimierung bzw. Neukonzeption zweiseitiger Immunoassays zur Quantifizierung von Hev b 1 und Hev b 6.01, Inhibitionstests zur Quantifizierung des Gesamtlatexallergengehalts, Quantifizierung von Hev b 5 mittels Inhibitionstest mit spezifischen IgE-haltigen Patientenseren.

Ergebnisse:

Von 14 beschriebenen und nach der Allergennomenklatur benannten Latexeinzelallergene sind im IPA neun Klone verfügbar: rHev b 1, rHev b 2, rHev b 3, rHev b 5, rHev b 6.01, rHev b 6.02, rHev b 6.03, rHev b 8, rHev b 10. rHev b 5 wies eine sehr hohe Allergenität auf. Mehr als 80% der getesteten Latexallergikerseren aus dem Gesundheitswesen enthielten spezifisches IgE gegen Hev b 5. Weitere Untersuchungen haben gezeigt, dass bisherige kommerziell eingesetzte Latexallergendiagnostika kein bzw. nur wenig Hev b 5 enthalten. Hier wurden in Zusammenarbeit mit der Industrie mit rHev b 5 versetzte Latexdiagnostika entwickelt, die beim Vergleich mit bisherigen Nachweisverfahren für Latex-IgE in fast allen getesteteten Fällen einen höheren Wert ergaben und die Zahl falsch negativer Ergebnisse verringerten.
Das Hev b 6.01 gehört zu den wichtigsten Latexallergenen. Es ist ein 24 kD Präprotein und besteht aus zwei Untereinheiten, dem Hevein (Hev b 6.02; N-terminaler Bereich) und der C-Domäne (Hev b 6.03). Es zeigte sich, dass die IgE-bindenden- (B-Zell-Epitope) und T-Zell-aktivierenden- (T-Zell-Epitope) Bereiche in verschiedenen Regionen des Hev b 6.01 Moleküls liegen.
Für drei Latexeinzelallergene wurden Messverfahren zur Quantifizierung aufgebaut: Hev b 1, Hev b 6.01 und Hev b 5.

Veröffentlichungen:

  • Baur X, Chen Z:Summary of appropriate measures to prevent natural rubber latex allergy. Allergologie International 1999; 48:31-62.
  • Chardin H, Chen Z, Raulf-Heimsoth M, Mayer C, Senechal H, Desvaux FX, Peltre G:Identification of Hev b1 in natural latex mattresses. Int Arch Allergy Immunol 2000; 121:211-43.
  • Chardin H, Chen Z, Raulf-Heimsoth M, Mayer C, Senechal H, Desvaux FX, Peltre G: Detection and 2D gel characterization of two major latex allergens in various latex extracts. Allergy 2001; 54:127-84.
  • Chen Z: Impact of isolated and recombinant allergens in diagnosis of latex allergy. In: Booklet Pharmacia Symposium 'Can tests with different allergen components provide new clinical information?'. Lisbon, Portugal: 2000: 4-5.5.
  • Chen Z, Baur X: Naturlatexallergengehalt in Gummiartikeln und in der Raumluft von Krankenhäusern und Arztpraxen. Allergologie 1999; 22:598-6056.
  • Chen Z, Düser M, Flagge A, Maryska S, Sander I, Raulf-Heimsoth M, Baur X: Identification and Characterization of Cross-Reactive Natural Rubber Latex and Ficus benjamina Allergens. Int Arch Allergy Immunol 2000; 123:291-8
  • Chen Z, Rihs HP, Slater JE, Paupore E.J., Schneider EM, Baur X: The absence of Hev b 5 in capture antigen may cause false-negative results in serologic assays for latex-specific IgE antibodies. J Allergy Clin Immunol 2000; 105:S838
  • Cremer R, Chen Z, Blaker F, Baur X: Pattern of IgE antibodies against latex allergens in children with spina bifida. Eur J Pediatr Surg 1999; 9 Suppl 1:49-509.
  • Cremer R, Chen Z, Rihs HP, Baur X: Naturlatexallergie: Von der Beschreibung des Phänomens zur Epitopanalyse. Monatsschrift Kinderheilkunde 1999; 147:544-5110.
  • Doekes G, van Niftrik M, Portengen L, Tomazic-Jezic VJ, Chen Z, Nij EIT, de Wind S, Heederik DJ: Measurement of Latex Proteins in Low-Volume Airborne Samples and Glove Extracts with a Sandwich EIA Using Polyclonal Rabbit Anti-Latex IgG. J Allergy Clin Immunol 2001; 107:A43811.
  • Korn M, Chen Z, Sander I, Maryska S, Raulf-Heimsoth M: Gepuderte Kofferdamgummis als Ursache fortgesetzter obstruktiver Ventilationsstörungen bei Zahnarzthelferinnen. Zentralblatt f Arbeitsmedizin 2001; 51:18112.
  • Lundberg M, Chen Z, Rihs HP, Wrangsjo K: Recombinant spiked allergen extract. Allergy 2001; 56:794-513.
  • Raulf-Heimsoth M, Chen Z, Rihs H, Rozynek P: T- und B-Zellepitope im Latexallergen Hev b 6.01 (Prohevein). Allergo J 2001; 10:2514.
  • Raulf-Heimsoth M, Rihs HP, Rozynek P, Baur X, Chen Z: Recombinant latex allergens rHev b 6.01, rHev b 6.02, rHev b 6.03 induced different T cell reactivity. J Allergy Clin Immunol 2001; 107:38115.
  • Raulf-Heimsoth M, Sander I, Chen Z, Borowitzki G, Diewald K, van Kampen V, Baur X: Development of a monoclonal antibody-based sandwich ELISA for detection of the latex allergen Hev b 1. Int Arch Allergy Immunol 2000; 123:236-4116.
  • Raulf-Heimsoth M, Sander I, Diewald K, Chen Z, Borowitzki G, van Kampen V, Baur X: Development of a monoclonal antibody based sandwich ELISA for the detection fo the latex allergen Hev b1. Amer J Resp Crit Care Med 1999; 159:A23317.
  • Rihs HP, Chen Z, Rozynek P, Baur X, Lundberg M, Cremer R: PCR-based cloning, isolation, and IgE-binding properties of recombinant latex profilin (rHev b 8). Allergy 2000; 55:712-718.
  • Rihs HP, Chen Z, Rozynek P, Cremer R:Allergenicity of rHev b 10 (manganese-superoxide dismutase). Allergy 2001; 56:85-619.
  • Rihs HP, Chen Z, Schumacher S, Rozynek P, Cremer R, Lundberg M, Raulf-Heimsoth M, Petersen A, BaurX: Recombinant hev b 1: large-scale production and immunological characterization.Clin Exp Allergy 2000; 30:1285-92

Koordination am IPA